另一方面,鱼类转基因育种需要解决转基因效率低下和筛选困难的问题。做转基因鱼的研究同仁可能都有这样的体会,我们往往需要养殖成百上千的转基因鱼PO代个体才有可能筛选获得具有优良性状的转基因F1代。因此,转基因鱼PO代研制、养殖、筛选的工作强度都非常巨大,耗时耗力,这已经成为制约转基因鱼广泛应用的重要因素之一。事实上,我们研制转基因PO代的最终目的是获得转植基因可以高效遗传的PO代个体。因此,从本质上而言,我们在研制PO代转基因鱼的时候,不是为了研制转基因的PO代个体自身,而是为了研制转基因的PO代生殖细胞。也就是说,我们并不关心PO代鱼的体细胞是不是转基因的,更关心的是PO代鱼的生殖细胞是不是转基因的。因此,如果我们能够创制一个高效地筛选转基因原始生殖细胞的方法,将可以极大地提高转基因鱼的生殖传递效率。
以上两个问题的解决方案都和鱼类的生殖细胞密切相关,而生殖细胞由原始生殖细胞发育而来,因此我们以鱼类原始生殖细胞为操作对象开展工作。首先,我们克隆了与细胞凋亡相关的因子,并开展细胞凋亡相关因子的过表达试验。可以发现,当细胞凋亡相关因子在整个胚胎里面过表达的时候,可以导致胚胎出现整体的细胞凋亡;如果仅仅只在原始生殖细胞里面过表达细胞凋亡相关因子,则发现胚胎发育在整体上是正常的,但是原始生殖细胞被特异剔除了。那么这个效应是不是由于生殖细胞的靶向凋亡造成的?
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