《电纺纳米纤维膜固定化酶的制备、性能及应用》：
3）溶胶-凝胶包埋和共价吸附
将酶溶解在可溶性的溶胶-凝胶前体中，通过物理方法或者化学方法形成凝胶，将酶包裹在凝胶中然后通过戊二醛进行交联，酶在这样的固定体中稳定性高，而且半衰周期长。该体系中底物可以透过固定体的孔道与酶发生接触反应，而且该固定体的孔径是可以控制的。同时，在包埋之后酶的四级结构没有发生太大的变化，故催化效率与原酶相比也没有太多的变化，但是酶的稳定性得到比较大的提高，用溶胶一凝胶法制备的β-半乳糖苷酶在含有钾离子、镁离子和磷酸盐的缓冲液中保持了良好的稳定性。在固定脂肪酶时用此方法，其活性与传统的有机反应相比最大可提高80倍。
4）位点特异性固定化
酶分子通过特定的位点与载体共价结合或亲和连接的固定过程称作位点特异性固定化酶。这种结合可以避免对酶活性位点的破坏，同时控制酶方向性，还可以长时间保持酶的活性，基质还可以再利用，大大提高酶的固定量。
目前，利用特异性固定化技术已经得到了广泛的应用，如免疫中的抗生物素蛋白一生物素、抗原一载体模式、载体底物一酶模式等。通过这些特异性的结合避免了酶与载体结合时发生多点结合，多重定位，从而空间障碍被大量的消除，该方法在亲和色谱中很早就已经被广泛地应用。
5）印迹酶固定法
印迹酶固定法是指酶的活性中心由于配基、底物或者添加的底物存在使得构象发生改变，构象改变后再用共价包埋、交联、冷冻干燥等技术进行固定，这种方法可以改变酶的选择性或活力。印迹酶的方法主要是基于温度、pH、结合配基、离子强度等使得酶构象发生变化，然后将酶的构型保持在这种状态，保持构型的稳定性，从而使酶的活性得到保持。目前，该方法在蔗糖转化酶、卢一淀粉酶、胰蛋白酶等已经得到应用，然而这些酶在固定的时候为了保护活性位点一般要添加底物，否则酶的活性将会降低甚至完全消失。
6）修饰固定化酶
修饰固定化酶是先对酶进行化学试剂的作用之后，再对其进行固定化，这样经过化学修饰之后酶的活性与之前相比有所提高，同时也不会影响酶的活性。这种方法主要分为两种：先修饰酶再固定化，或者固定前对酶进行氨基酸残基修饰、加人不饱和键、改变酶的疏水性，如将酶用乙二醇、右旋糖苷等修饰后使得酶的热稳定性提高，然后再进行包埋、交联等处理；先固定后修饰，就是先用化学或者物理的方法对酶进行固定，然后再使用化学试剂对酶进行修饰，如为了提高酶制剂的稳定性可以用甲醛处理固定化后的青霉素酰化酶，另外，用牛血清白蛋白处理固定化青霉素V酰化酶可以进一步提高酶的稳定性。
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