搜索
高级检索
高级搜索
书       名 :
著       者 :
出  版  社 :
I  S  B  N:
文献来源:
出版时间 :
蛋白质工程原理与技术
0.00    
图书来源: 浙江图书馆(由图书馆配书)
  • 配送范围:
    全国(除港澳台地区)
  • ISBN:
    7560724655
  • 作      者:
    刘贤锡主编
  • 出 版 社 :
    山东大学出版社
  • 出版日期:
    2002
收藏
内容介绍
    《蛋白质工程原理与技术》共十章,第一章简要介绍了蛋白质工程的基本理论、基本内容及其程序、应用和进展;第二章至第四章分别介绍了蛋白质结构与功能、基因重组及定点诱变技术的基本原理;第五章至第七章分别介绍了蛋白质工程在酶蛋白质、抗体以及蛋白质及多肽药物研究中的应用;第八章和第九章分别介绍了蛋白质分离纯化与结构分析常用技术的原理及其应用;由于在蛋白质工程中常需要生物信息学对蛋白质的结构和功能进行分析并为蛋白质的结构改造进行预测,所以,《蛋白质工程原理与技术》第十章,对生物信息学进行了简要介绍。
展开
精彩书摘
    事实上,在许多个体中已发现一些变异蛋白,伴有氨基酸的插入、丢失、或替换,但蛋白质仍保持正常功能。如前所述,将枯草杆菌蛋白酶催化部位Ser221邻近的Met222置换,可以提高该酶蛋白的抗氧化性,又能保持酶的催化活性,就是一个典型的例子。随着蛋白质三维结构分析技术的不断发展,借助于电脑对蛋白质结构域与功能域信息的处理及设计,采用定点诱变技术从基因水平改变氨基酸编码顺序即可获得与天然蛋白质的理化性质相异而生物活性相似的突变蛋白质。
    生物技术的兴起使得分子生物学的理论与工程实践紧密结合。20世纪70年代初期,DNA重组技术诞生,并成功地应用于基因操作,从而产生了基因工程。而基因工程的诞生,特别是DNA重组技术和基因定点诱变等技术的建立,使我们有可能从基因水平改造蛋白质分子中氨基酸的序列,为蛋白质工程的诞生,奠定了技术基础。所谓基因定点诱变,就是在DNA水平上,通过对蛋白质结构基因中某个或某些氨基酸编码顺序加以改变,从而改变蛋白质结构的技术。该技术不仅可用于改造天然蛋白质,而且可以用于确定蛋白质中每一个氨基酸在结构和功能上的作用,以收集有关氨基酸线形顺序与其空间构象和生物学活性之间的对应关系,为人工改造蛋白质提供理论依据。
    总之,蛋白质结构和动力学研究是蛋白质结构与功能关系研究的重要手段,而改造蛋白质结构,则依靠基因工程,基因工程的发展从技术上提供了改变蛋白质个别氨基酸残基或肽段的手段,使结构改变已能在实验室实施,二者结合则产生了蛋白质工程。
    二、蛋白质工程的研究内容
    (一)利用已知蛋白质一级结构的信息作为应用研究
    蛋白质的结构决定蛋白质的功能和理化性质,而蛋白质功能区的某个或某些氮基酸残基可能在维持蛋白质的结构、功能、理化性质中起重要作用。因此,定点改变这些氨基酸序列,即可能改变蛋白质的功能和特性,使之更适合于工业化生产的要求。随着蛋白质结构与功能关系研究技术以及基因工程技术的发展,上述设想已不再是可想而不可及。通过蛋白质结构与功能研究,利用蛋白质构型信息的图像和程序分析,即可找出与蛋白质功能和特性密切相关的氨基酸序列,而采用定点诱变与盒式突变技术定向改变编码蛋白质的基因,即可改造蛋白质的结构,使它们的生物功能及理化特性得到改变。如前所述枯草杆菌蛋白酶之所以易被氧化失活,是由于催化部位的Ser221邻近的Met222易被氧化成硫氢化物,若以其他氨基酸取代Met222,则可提高酶的氧化稳定性而又不影响其催化活性。这是结构分析和定点突变改造蛋白质的成功范例。枯草杆菌蛋白酶可作为洗涤剂的添加剂,但由于其只能水解Phe羧基所形成的肽键,底物作用范围过窄而限制了洗涤剂的高效性,若用带正电荷的Lys取代位于活性中心166位的Gly,所获得的突变酶不仅能水解Phe羧基所形成的肽键,而且可以水解酸性氨基酸Glu所形成的肽键,使其底物作用范围拓宽,因而可能成为最高效的洗涤剂添加酶,这是定点诱变改变蛋白质生物学活性的成功例子。
    ……
展开
目录
第一章 绪论
第一节 蛋白质工程概论
一、蛋白质工程的理论基础
二、蛋白质工程的研究内容
三、蛋白质工程的基本程序
第二节 蛋白质工程的应用
一、研究蛋白质结构与功能的关系
二、改变蛋白质的特性
三、生产蛋白质和多肽类活性物质
四、设计合成全新蛋白质
第三节 蛋白质工程展望

第二章 蛋白质的结构与功能
第一节 蛋白质的基本结构与功能
一、蛋白质的组成
二、蛋白质的一级结构
三、蛋白质一级结构与功能的关系
第二节 蛋白质的空间结构与功能
一、蛋白质的二级结构
二、超二级结构和结构域
三、蛋白质的三级结构
四、蛋白质的四级结构
五、蛋白质空间结构与功能的关系
六、蛋白质—蛋白质相互作用

第三章 基因重组技术
第一节 工具酶
一、限制性核酸内切酶
一、其他工具酶
第二节 载体
一、质粒
一、噬菌体载体
三、表达载体
第三节 基因克隆的基本程序
一、目的基因的制备
一、目的基因与载体重组
三、重组DNA导入宿主细胞
四、重组体的筛选与鉴定
第四节 真核基因在大肠杆菌中的表达
一、真核基因在大肠杆菌中表达的基本条件
一、真核基因在大肠杆菌中的表达方式

第四章 定点诱变与蛋白质工程
第一节 定点诱变
一、M13DNA寡核苷酸诱变
一、PCR定点诱变
三、盒式诱变
四、随机诱变
第二节 蛋白质工程
一、加入二硫键
一、将Asn和Gln转换成其他氨基酸
三、减少游离Cys残基的数目
四、增加酶的活性
五、改变酶的特异性

第五章 酶蛋白质工程
第一节 酶的分子结构与催化功能
一、酶的结构特点与功能
二、酶催化作用的机制
三、酶促反应动力学参数
第二节 蛋白酶工程
一、枯草杆菌蛋白酶的定点改造
二、组织型纤溶酶原激活剂的定点改造
第三节 葡萄糖异构酶工程
一、结构特点及生物学性质
……
第六章 抗体工程
第一节 概述
第二节 抗体及其基因结构与抗体多样性的分子基础
第三节 鼠单抗的人源化
第四节 小分子抗体
第五节 抗体库技术

第七章 蛋白质和多肽药物工程
第一节 概述
第二节 激素类药物
第三节 细胞因子类药物

第八章 蛋白质分离纯化技术
第一节 蛋白质分析分离中的电泳技术
第二节 色谱技术
第三节 高效液相色谱

第九章 蛋白质结构分析技术
第一节 蛋白质和多肽的氨基酸序列分析
第二节 生物质谱技术在蛋白质和多肽结构测定中的应用
第三节 x射线晶体衍射技术在蛋白质晶体结构测定中的应用
第四节 核磁共振波谱技术在蛋白质结构测定中的应用

第十章 生物信息学
第一节 概述
第二节 生物信息数据库
第三节 生物信息学在性质研究中的应用
主要参考文献
展开
加入书架成功!
收藏图书成功!
我知道了(3)
发表书评
读者登录

请选择您读者所在的图书馆

选择图书馆
浙江图书馆
点击获取验证码
登录
没有读者证?在线办证