在1909年，兰德施泰纳最终找到了答案：人类的血液似乎看起来是一样的，但是当每个人被割伤或者遭遇其他伤害时，血液会出现不同的症状特点，他把这些不同症状称作为血型。他研究出一种方法可以将血液类型分为三种，也就是我们现在所熟知的A型，B型和O型血液（这是三种血型第一次被人发现）。他接着开始尝试在同血型之间的人进行输血手术，结果很成功。他发现只有向患者输入不同血型的血液时才会出现问题。
1902年，另外两名科学家发现了人类第四种主要的血型-AB型血。在这之后不久，鲁本·欧坦伯格首次（Reuben Ottenberg）尝试了按血型进行交叉配血试验，他还发现血型具有遗传性。
20年后，医生在按照血型进行输血的过程中仍然会偶然的碰到一些问题。1930年到1940年之间，卡尔·兰德施泰纳和其他3名科学家亚历克斯·维也纳（Alex Wiener）、菲利普·莱文（Philip Levine）和R.E.斯泰森（R.E.Stetson）发现了引起上述大多数输血反应的原因就是猕因子（又称Rh因子）。Rh因子是一种在红血球中发现的蛋白物质，85010的人都拥有这种物质（这些人被称为Rh阳性）另外15010的人则缺乏这种物质（这些人是Rh阴性）。如果Rh阴性的血液输入了Rh阳性的人的身体里，结果是非常严重的，甚至会产生致命的反应。当人们找到了如何去鉴定血液的Rh是阴性还是阳性的可靠方法时，人类就获得了输血中另一个重要的认知。
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