【牙齿硬组织磨片的制备】标本脱水:将需观察的已有早期龋的牙齿标本置于85%乙醇溶液中4小时,然后置无水乙醇溶液中过夜,取出后晾干1小时。
标本包埋:将脱水后的牙齿标本浸人盛有2ml精单体甲基丙烯酸甲酯的密闭容器中浸泡1小时,然后放入40度的烤箱中过夜固化。
制备切片:将包埋后的标本用硬组织切片机制成100—300m厚的切片。新鲜牙齿标本较易制备切片,储存时间较长的标本则难。国外制造的硬组织切片机切割片为金刚砂片,分内缘切割和外缘切割两种,价格都比较昂贵。国内尚无同类产品。笔者与他人合作,利用宝石切割打磨机改制的硬组织切片机(外缘型切片),基本可以满足切割牙齿硬组织的需要。
磨片技术:用一般硬组织切片机切割的牙片,需要进一步研磨成一定厚度的均匀磨片才可以在显微镜下观察或照显微射线相片。研磨时,将几个厚度大致相同的牙切片用环氧树脂固定在载物片上,在厚玻璃板上用300目的水磨金刚砂粉初磨至约150μm厚,再进一步用600目水磨金刚砂粉磨至100μm以下。磨片可按普通组织病理方法用光学树脂固定,在光学显微镜下直接观察。也可以直接在不同的介质中用偏振光显微镜观察。磨片还可照显微x线片,作进一步定量灰度分析。用于定量分析的磨片,技术要求较高,两个研磨面应平行,磨片厚度的变异应控制在5%左右。制成的磨片除进行普通光学观察之外,都应保存在生理盐水中,观察时取出以清水冲洗,吸干。
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