医学实验方法作为一种用于疾病诊断及临床科研的手段，随着学科的快速发展，已不再像往常一样，仅仅面对临床的病例。更深入更前沿的科研课题迫使研究者应用最先进的实验方法。为了适应临床科研与临床实验诊断的需要，我们组织有关的人员共同编写了本书，《临床医学实验方法学》分为临床实验研究方法与临床实验诊断方法两个部分，共计14篇：其中第1－8篇系临床实验研究方法，包括整体机能与器官功能检测方法、形态学方法、细胞功能检测方法、亚细胞结构及功能检测方法、医学化学分析方法、蛋白质与细胞因子的功能检测方法以及分子生物学方法等内容，概括了近年与临床科研相关的最先进的基础医学实验方法。第9－14篇系临床实验诊断方法，包括，临床体液检查方法、临床生化诊断方法、临床免疫学诊断方法、临床微生物诊断方法和临床血液学实验诊断方法等内容，是近年临床普遍常用的实验诊断方法。

    7.血清
    获得血后立即离心，最好使用塑料器皿，该器皿可延缓凝血过程。血标本回收在塑料注射器内（雄性大鼠20ml，雌性大白鼠10ml，小白鼠5ml），用长针迅速吸取标本，将新鲜标本转移到塑料锥形离心管内（12m1），离心，制备好的血清存在无菌的塑料制容器内，用于培养时先56℃水浴加热后使用。
    8.培养液
    文献报道大鼠胚胎的转动培养方法所用的培养液为同系大鼠的血清，以后发现血清的制备对成功地培养起关键作用。获得血液后立即离心制备的血清比延迟一段时间后再离心制备出的血清效果好。雄性、雌性、妊娠与非妊娠动物的血清对培养结果的影响无差异。某些稀释过的血清能改善12.5-13.5d的大鼠胚胎的发育进程。有人将血清稀释为75％，也有人稀释为90％，但稀释90％的血清在使用时加热过程中，由于水分的蒸发而浓缩，其渗透压可能又回到了原来血清的渗透压。稀释的血清小于75％，可使胚胎生长受到抑制。
    目前认为，接近大鼠血清效果的异种血清只有人血清。人血清内加糖3mg／ml有利于对胚胎培养的支持作用。虽然如此，人血清也不是大鼠血清完全的代用品，已证实90％的入血清与10％的大鼠血清混合在一起是较满意的培养液。25％的人血清、25％大鼠血清及50％的Weymouth，s基质液能成功地使9.5d的大鼠胚胎培养24h之久。
    ……

第一部分 临床实验研究方法
第一篇 整体机能与器官功能检测方法
第一章 动物模型的建立与功能检测方法
第一节 全胚胎培养模型
第二节 缺血一再灌注损伤模型
第三节 脑卒中动物模型
第四节 心衰模型
第五节 胃癌动物模型
第六节 糖尿病模型的制作
第七节 癫痫动物模型
第八节 肝损伤模型
第九节 动脉粥样硬化模型
第十节 速发型过敏性哮喘模型
第十一节 急性胰腺炎动物模型
第十二节 急性化脓性胆管炎动物模型
第十三节 人肝癌组织裸鼠模型的复制及实验室应用
第四节 器官移植模型
第二章 器官模型的建立和功能检测方法
第一节 离体器官的灌注方法
第二节 微透析技术与离体组织条方法
第三章 微循环实验方法
第一节 微循环实验方法概论
第二节 脏器微循环观测
第二篇 形态学方法
第四章 各种电镜及光、电镜免疫双标、三标方法
第一节 电镜标本的制作方法
第二节 铸型扫描技术
第三节 电子显微镜水平的低温技术
第四节 双重和多重免疫标记
第五节 光镜三标和电镜三重显示技术
第五章 逆行追踪及免疫细胞化学方法
第一节 辣根过氧化物酶法
第二节 荧光素逆行标记法
第三节 免疫荧光法
第四节 酶标记抗体法
第五节 非标记抗体过氧化物酶一抗过氧化物酶法（PAP法）
第六节 抗生物素蛋白一生物素一过氧化物酶复合体法（ABC法）
第七节 HRP逆行追踪与免疫细胞化学结合法（PAP法）
第八节 荧光素逆行标记与免疫荧光结合法
第六章 形态测量学方法
第一节 目镜测微器定量分析
第二节 定量分析的影响因素
第三节 计算机图像分析和三维结构重建
第七章 原位分子杂交及应用
第一节 原位分子杂交组织化学技术基本原则
第二节 原位杂交探针制备和标记
第三节 常见原位杂交方法
第八章 其他方法
第一节 苏木精－伊红染色的应用和局限性
第二节 固定液的选择及要点
第三节 特殊细胞的形态学鉴定方法
第四节 免疫组织化学染色操作的注意事项、对照设计及结果判断
第三篇 细胞功能检测方法
第九章 普通细胞培养方法
第一节 培养室仪器设备及试剂
第二节 原代分离细胞培养
第三节 细胞克隆化
第四节 组织块培养
第五节 器官培养
第六节 体内细胞培养及细胞培养新技术
第七节 细胞培养中饲（滋）养细胞的制备及成纤维细胞的去除
第八节 细胞培养中污染检测和排除
第九节 培养细胞的观察
第十节 培养细胞的冻存、复苏与运输
第十章 特殊细胞培养方法及细胞培养方法的应用
第一节 神经细胞培养方法
第二节 肝细胞、库普弗和伊藤痣细胞的分离与培养
第三节 血管平滑肌细胞的分离与培养
第四节 内皮细胞的分离和培养
第五节 特殊免疫细胞的培养
第六节 脂肪细胞培养
第七节 中国地鼠卵巢细胞和巨噬细胞的培养
第八节 肿瘤细胞培养
第九节 细胞培养在B淋巴细胞杂交瘤技术中的应用
第十节 无血清培养细胞的应用
第十一节 细胞培养在细胞转化及癌基因研究中的应用
第十二节 肝炎病毒细胞模型
第十一章 信号传递与细胞通讯
第一节 细胞间缝隙连接通讯的检测
第二节 细胞膜受体的分离与纯化
第三节 第二信使系统
第十二章 电生理学方法在细胞通讯研究中的应用
第一节 可兴奋细胞动作电位的记录方法
第二节 双微电极电压钳技术
第三节 膜片钳技术
第四节 各种诱发电位的检测
第五节 其他方法
第四篇 亚细胞结构及功能检测方法
第十三章 细胞膜的制备与功能检测方法
第一节 细胞膜的制备
第二节 细胞膜功能的测定
第十四章 线粒体的制备和应用
第一节 线粒体的制备
第二节 线粒体功能特征的检测
第三节 线粒体功能检测的应用
第十五章 微粒体的制备及微粒体酶系的测定
第一节 微粒体的制备
第二节 Cyt.P-450的多样性和MFOs的纯化与重组
第三节 微粒体混合功能氧化酶系活性的测定
第四节 诱导肝微粒体混合功能氧化酶的动物模型
第五节 溶酶体和过氧化氢酶体的制备和应用
第十六章 肾脏与小肠质膜的制备及应用
第一节 肾和小肠质膜的分离制备
第二节 制备物的性质鉴定
第五篇 医学化学分析方法
第十七章 脂质和生物膜中脂质过氧化反应产物的检测
第一节 检测氧自由基实验方法
第二节 脂质过氧化降解产物的测定
第三节 不饱和脂肪酸测定法
第十八章 大型分析仪器在医学研究中的应用
第一节 离心分离技术
第二节 色谱分析
第三节 光谱分析
第四节 电化学检测
第十九章 流式细胞术
第一节 基本原理
第二节 流式细胞常用荧光染料
第三节 制备单细胞悬液技术
第四节 细胞的荧光标记
第五节 流式细胞术的数据分析
第六节 应用流式细胞术检测凋亡细胞的方法
第六篇 蛋白质与细胞因子的功能检测
第二十章 蛋白质的分离与纯化
第一节 生物材料的前处理及蛋白质抽提
第二节 蛋白质的初步纯化
第三节 蛋白质的进一步纯化
第四节 纯化步骤的安排
第五节 样品纯度鉴定
第二十一章 蛋白质的序列测定
第一节 序列测定前的准备
第二节 蛋白质分子量的测定
第三节 氨基酸组成分析
第四节 蛋白质末端氨基酸分析
第五节 蛋白质的部分裂解及肽片段的分离
第六节 肽片段的氨基酸序列测定
第七节 蛋白质一级结构的推定
第二十二章 细胞因子的检测
第一节 概论
第二节 白细胞介素的检测
第三节 其他细胞因子的检测
第七篇 分子生物学方法
第二十三章 核酸的提取
第一节 质粒DNA的制备
第二节 入噬菌体DNA的提取与纯化
第三节 真核细胞DNA的制备
第四节 真核细胞RNA的制备
第二十四章 核酸的电泳与纯化
第一节 核酸凝胶电泳的原理及影响因素
第二节 琼脂糖凝胶电泳
第三节 碱性琼脂糖凝胶电泳
第四节 聚丙烯酰胺凝胶电泳
第五节 脉冲场凝胶电泳
第六节 各种凝胶电泳的应用
第七节 核酸片段的回收
第八节 核酸的层析技术
第九节 超迷离心技术
第二十五章 核酸分子杂交及核酸序列分析技术
第一节 核酸探针的标记
第二节 核酸分子杂交
第三节 限制性片段长度多态性分析
第四节 核酸序列分析技术
第二十六章 基因克隆
第一节 DNA的限制性内切酶技术
第二节 目的基因的制备
第三节 质粒载体
第四节 连接反应
第五节 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化
第六节 含重组质粒的细菌菌落的鉴定
第二十七章 基因文库的构建
第一节 基因组文库的构建
第二节 cDNA文库的构建（一）
第三节 cDNA文库的构建（二）
第二十八章 外源基因在原核细胞中的表达
第一节 宿主细胞
第二节 原核表达载体
第三节 外源基因的诱导表达
第四节 包涵体的分离与蛋白质纯化
第五节 表达产物的检测
第六节 融合蛋白表达系统
第二十九章 外源基因在真核细胞中的表达
第一节 真核载体的基本元件
第二节 真核基因转移载体
第三节 外源基因导入真核细胞的方法
第四节 重组反转录病毒介导的基因转移
第五节 重组腺病毒介导的基因转移
第三十章 聚合酶链式反应
第一节 PCR的原理与基本操作
第二节 PCR引物设计
第三节 PCR模板的制备
第四节 PCR扩增产物的分析
第五节 PCR相关技术及应用
第六节 差异显示及其他PCR新技术
第三十一章 核酸与蛋白质互相作用的分析方法
第一节 宿主细胞蛋白的提取
第二节 DNA和蛋白质的互相作用
第三节 RNA和蛋白质的互相作用
第三十二章 未知基因的克隆策略
第一节 抑制性消减杂交
第二节 差异显示PCR
第三节 基因芯片技术
第四节 cDNA末端快速扩增
第三十三章 电子计算机在分子生物学中的应用
第一节 分子生物学中的数据库
第二节 序列同源性比较和对库同源检索
第三节 蛋白质结构和功能位点预测
第四节 实验辅助设计
第八篇 医学科研设计、统计学分析及医学科研结果的计算机处理
第三十四章 医学科研设计
第一节 研究设计的基本内容
第二节 不同场合的研究设计
第三节 研究设计的类型
第三十五章 医学统计方法
第一节 几个基本概念
第二节 统计学指标
第三节 t分布与t检验
第四节 方差分析
第五节 直线回归与相关
第三十六章 医学科研论文的写作与发表
第一节 医学科研论文的写作
第二节 医学科研论文的发表

第二部分 临床实验诊断方法
第九篇 检验质量保证和实验室数据的合理应用
第三十七章 检验质量保证与全程质量管理
第一节 分析前的质量管理
第二节 分析阶段的质量管理
第三节 分析后的质量管理
第三十八章 医学试验的选择和评价
第一节 方法的选择
第二节 方法学的评价
第三节 医学诊断试验的临床评价指标
第四节 用ROC曲线评价医学试验的临床准确性
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第十篇 临床一般体液检查
第十一篇 临床生物化学诊断
第十二篇 临床免疫学诊断
第十三篇 临床微生物诊断
第十四篇 临床血液学实验诊断