主编：

龚芸（Yun Gong），美国德克萨斯州立大学MD安德森癌症中心病理系教授，

主译：

赵君，第四军医大学第一附属医院西京医院病理科

薛德彬，华夏病理网/粉蓝医疗科技（杭州）有限公司学术部

本书详细罗列了细胞学领域常用的免疫化学标记物的应用，常见的四大主要细胞分化谱系肿瘤及其主要病种的免疫表型模式，因此可作为日常工作中的实用参考书。另外，本书还涵盖流式细胞术免疫分型、细胞遗传学和分子学研究等领域的进展，以及*新研发的有望改变病理学实践的生物标记物。 

第2章 标本采集、制备、快速现场评估及分检

2.1 标本采集及制备

    成功的FNA 检查取决于病变性质（如大小、位置、病变质地）、穿刺者的技术以及有无快速现场评估。可触及的大病变可由病理医师穿刺，深部的小病变通常由放射科医师在影像学引导下进行穿刺，常用22~25号（对应国产7 号至5 号针头）细针穿刺2~3 针，将穿刺物滴在几张玻璃片上并进行涂片。

    涂片常用两种染色：风干涂片做Diff-Quik 染色，95% 乙醇或Carnoy液固定的湿片做巴氏染色。这两种染色对于细胞学诊断有互补作用：Diff-Quik 染色可以较好地显示胞质细节和背景及细胞外物质，而巴氏染色则更好地展示了细胞核的细节，比如核膜、染色质以及核仁。有些实验室也用液基制片（如ThinPrep 和SurePath）。

    针道中残留的细胞可以用细胞保存液（如RPMI-1640 保存液）涮洗下来，离心后根据沉淀物的大小制备细胞蜡块或离心涂片。然而，如果快速现场评估时临床信息以及细胞学形态提示淋巴造血系统肿瘤可能，就应该首选送检流式细胞分析，这时需要将新鲜细胞收集并保存至含胎牛血清的保存液中。

2.2 快速现场评估及样本分检

    快速现场评估的过程包括评估标本满意度和制定标本分检策略，从而保证或提高诊断的准确性。通常由病理医师进行现场评估，并将直接涂片上的细胞学表现（通常现场评估只有Diff-Quik 染色涂片，不一定有巴氏染色涂片）与临床和影像学资料相结合（亦称“三联检验”）。与穿刺医师的沟通尤其重要。

    在进行快速现场评估时，以下的问题是关键，需要逐一考虑。

• 肿瘤或非肿瘤

• 如果是肿瘤，良性或恶性

• 肿瘤细胞分化谱系是什么

• 肿瘤亚型是什么

• 原发或转移

• 原发部位在哪里

    为了获取详细的临床及影像学资料，可以通过查寻病历及与临床医师交流获取。除了年龄、性别、病史及患者当前表现，目前病变的影像学信息也很重要。以肺部病变为例，现场评估时需要了解病变大小、位置（中央或周边，上叶或下叶）、数量（单发或多发）、边界清楚与否和其他信息（如：有无空洞、肺门淋巴结肿大和吸烟史），有肺门淋巴肿大及吸烟史往往提示肺原发性肿瘤而非转移性。再比如，若病人有乳腺癌病史，则常常需要了解原发性肿瘤的类型（导管型、小叶型或其他）、组织学及核级别、淋巴结转移情况、激素受体表达情况、从原发肿瘤初始诊断到此次FNA之间的时间间隔以及目前病变的部位（局部区域淋巴结或远处转移）。有时，异常的实验室血清学检查也可为诊断某些肿瘤的原发灶提供线索（如CA19.9 与胰腺腺癌，AFP 与肝细胞癌和某些生殖细胞肿瘤，CA125 与卵巢浆液性肿瘤，降钙素与甲状腺髓样癌，PSA 与前列腺癌）。诊断时首先考虑常见病变然后才考虑少见病变。

    评估标本满意度要基于三联检验。如果一个标本的细胞学特点符合临床及影像学信息，则认为这个标本是“满意的”。如果一个标本含极少细胞数量或含有纤维组织、与临床表现及影像学所见不符合，或呈显著的细胞扭曲及人为的假象，那么这个标本就应当判为“不满意的”。当病变的三联检验出现不符合的情况，建议重新取样。

    快速现场评估中对满意的FNA 标本应当恰当分检，以确保最终获得明确的、富含信息的诊断。标本分检的策略取决于快速现场评估时低倍镜及高倍镜下直接涂片的细胞学特征（表2-1）。恶性肿瘤的总体细胞学特征见表2-2。标本分检时对那些有可能需要依赖组织学结构或免疫化学染色确诊的病变应当要求现场再次穿刺以获取良好的细胞蜡块；如果病变看似呈感染性，则需要为微生物培养预留标本；如果病变特点疑似非霍奇金淋巴瘤，则需要首先为流式细胞术免疫分型预留标本；如果病变来自儿科患者且呈小圆蓝细胞肿瘤特点或预计某病变可能需要采用靶向治疗时，则需要为细胞遗传学及分子学检测预留标本；如果病变的细胞学特点疑似肉瘤或霍奇金淋巴瘤，则应该要求获取相应的粗针穿刺活检（CNB）（图2-1）。

第1章 总论

第2章 标本采集、制备、快速现场评估及分检

第3章 形态学评估

第4章 免疫化学研究

第5章 流式细胞术免疫分型

第6章 细胞遗传学研究

第7章 分子学研究

索引