合成生物学是生命科学发展过程中产生的一门综合性学科。其基本实验技术主要涉及基因工程、代谢调控、基因编辑等。本书就合成生物学研究常用实验对象——大肠杆菌进行系统性实验设计。按照合成生物学基础实验流程：菌株的感受态制备、琼脂糖凝胶的制备、核酸提取及验证、工具酶使用、载体构建、阳性转化子筛选、蛋白质表达及鉴定以及基因编辑实验流程进行编写。同时设置了相关的思考题以帮助读者进一步了解该实验。 书中对每一个实验的原理进行了清晰的描述，书中所展示的实验技术不同于传统的分子生物学技术，而是对数个博士实验常用技术改进并总结，包含更加便捷高效的实验技巧。本教材适合作为高等学校合成生物学、生物工程等专业的实验教材，也是初入合成生物学领域科研人员、教学工作人员不可多得的参考书。

第一章 感受态细胞的快速制备及转化
第一节 感受态细胞的化学法快速制备
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料、试剂与设备
四、实验流程
五、注意事项
六、思考题
第二节 利用热激法制备的感受态细胞进行转化
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料、试剂与设备
四、实验流程
五、注意事项
六、思考题
第三节 感受态细胞的电转化法快速制备
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料、试剂与设备
四、实验流程
五、注意事项
六、思考题
第四节 利用电转化法制备的感受态细胞进行转化
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料、试剂与设备
四、实验流程
五、注意事项
六、思考题
第二章 PC R扩增及琼脂糖凝胶核酸电泳技术
第一节 常规PCR技术
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料、试剂与设备
四、实验流程
五、注意事项
六、思考题
第二节 重叠延伸PCR技术
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料、试剂与设备
四、实验流程
五、注意事项
六、思考题
第三节 定点突变PCR技术
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料、试剂与设备
四、实验流程
五、注意事项
六、思考题
第四节 琼脂糖凝胶核酸电泳技术
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料、试剂与设备
四、实验流程
五、注意事项
六、思考题
第三章 DNA提取
第一节 大肠杆菌基因组的提取（机械破胞+柱法回收）
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料、试剂与设备
四、实验流程
五、注意事项
六、思考题
第二节 质粒提取（碱裂解+柱回收法）
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料、试剂与设备
四、实验流程
五、注意事项
六、思考题
第三节 PCR产物回收（乙醇沉淀法）
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料、试剂与设备
四、实验流程
五、注意事项
六、思考题
第四节 PCR产物／酶切产物纯化（柱提法）
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料、试剂与设备
四、实验流程
五、注意事项
六、思考题
第四章 工具酶的使用以及载体构建
第一节 限制性核酸酶（印，7 1）的使用
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料、试剂与设备
四、实验流程
五、注意事项
六、思考题
第二节 限制性核酸内切酶的使用
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料、试剂与设备
四、实验流程
五、注意事项
六、思考题
第三节 连接酶的使用
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料、试剂与设备
四、实验流程
五、注意事项
六、思考题
第四节 T载体构建
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料、试剂与设备
四、实验流程
五、注意事项
六、思考题
第五章 阳性转化子的筛选与鉴定
第一节 菌落PCR鉴定
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料、试剂与设备
四、实验流程
五、注意事项
六、思考题
第二节 基于蓝白斑筛选的载体构建
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料、试剂与设备
四、实验流程
五、注意事项
六、思考题
第三节 基于荧光蛋白报告基因的载体构建和鉴定
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料、试剂与设备
四、实验流程
五、注意事项
六、思考题
第四节 选取载体的重鉴定
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料、试剂与设备
四、实验流程
五、注意事项
六、思考题
第六章 蛋白质表达纯化及鉴定
第一节 蛋白质表达
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料、试剂与设备
四、实验流程
五、注意事项
六、思考题
第二节 细胞收集与破碎
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料、试剂与设备
四、实验流程
五、注意事项
六、思考题
第三节 蛋白质纯化
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料、试剂与设备
四、实验流程
五、注意事项
六、思考题
第四节 SDS—PAGE电泳
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料、试剂与设备
四、实验流程
五、注意事项
六、思考题
第七章 CRISPR技术应用
第一节 CRISPR基因敲除
一、实验目的
二、实验原理
三、实验材料、试剂与设备
四、实验流程
五、注意事项
六、思考题