秦文斌,男,1928年生,沈阳人,虽已离休,还在做实验研究。他是1953年中国医科大学研究生班毕业,留校任助教。1956年支援边疆来到内蒙古,扎根边疆,直至今日。
本书著者一生的科研可分成三个阶段,第一阶段是研究血红蛋白,由1964年开始。第二阶段是研究红细胞电泳释放血红蛋白,由1981年开始。第三阶段是研究疾病的基因诊断,由1992年开始。第一阶段出版一本书,书名《血红蛋白病》,由人民卫生出版社出版。第二阶段出版一本书,书名《红细胞内血红蛋白的电泳释放》,由科学出版社出版。第三阶段出版的《基因诊断:多重PCR和通用引物PCR》,还由科学出版社出版。
本书著者,于1992~1994年期间,以访问学者身份到美国Huisman教授的实验室研究血红蛋白病的基因诊断。
1994年访美归来,学校领导提出“基础与临床结合”、“基础为临床服务”,要求开展创收性临床研究。研究什么呢?血红蛋白病少见,感染性疾病多见,著者决定开展感染性疾病病原体的基因诊断。由于没有经验,开始时使用市售的PCR试剂开展工作。
此时,中国出现“PCR热”,各厂家竞争激烈,个别人报出虚假结果,媒体哗然。卫生部下令:“PCR暂停”。
但是,著者还想开展PCR工作。PCR暂停,厂家都没了,所有东西都需自己解决。首先要解决的问题是如何由临床标本提取DNA。为此,经过多方比较研究,著者创建一种提取DNA的裂解液,它能够处理各种不同的临床标本,故称为“通用裂解液”。接着的问题是PCR扩增、需要扩增用的反应液。同样,经过一系列努力,著者创建一套配制反应液的方法,它能够包容各种引物序列,故称为“通用反应液”。
联合使用这两个“通用”(通用裂解液、通用反应液),能够顺利完成各种PCR实验(普通PCR、多重PCR、通用引物PCR等)。
先说普通PCR。利用两个“通用”,著者完成了大量普通PCR服务工作。许多研究单位,在PCR实验中遇到困难时找到这里,著者帮助解决,免费服务。特别是临床研究生,著者帮助他们设计毕业论文,帮助他们完成实验。
再说多重PCR和通用引物PCR。利用两个“通用”,著者开展了多重PCR。此项工作是为患者服务,多重PCR能够提高工作效率(一个扩增解决两个或更多基因),有时还能比较两个基因的相对含量(如LB/GR)。通用引物PCR的标本为脑脊液,可以给脑炎、脑膜炎患儿的病因诊断提供有用线索。
总之,著者建立了一套PCR系统,应用于普通PCR、多重PCR和通用引物PCR,都得到满意结果。但是,这些成果构不成原创,是对经典PCR技术的学习和延续,错误肯定不少,请同行和读者们批评指正。
展开