《生物化学与分子生物学实验指导(双语版)》由龚朝辉主编,本教材系统介绍了生物化学与分子生物学常用实验的技术与原理(第一至第九章)、基础实验操作(第十至第十四章)和设计性实验(第十五至第十八章)。本教材在内容编排上逐层深入,共涵盖了蛋白质、酶、核酸、物质代谢和分子生物学五大实验模块,共计31个实验项目,反映了当今实验教学改革的成果;在写作风格上有明显创新,在简要介绍实验原理、材料准备的基础上,以新颖、独创的表格和流程形式清晰地描述了每个操作步骤的内容、要点(特别是注意事项和技巧分析),在结果部分指出了可能出现的常见问题及其处理方法,并在每个实验后附以思考题,这有利于拓展学生的思维。
目前绝大部分高校已开展双语(中英文)教学,还有大量留学生需开展全英文教学,但目前国内尚无一本正式出版的双语实验教材。《生物化学与分子生物学实验指导(双语版)》的配套课程在2008年作为全国地方高校第一批双语示范课程开展起来,同时实验课程在2010年获得省级精品课程。本书系统讲解了生物化学与分子生物学常用实验技术与原理、基础实验操作、设计性实验、附录。内容编排系统,逐层深入;内容共涵盖了蛋白质、酶、核酸、物质代谢和分子生物学实验5大模块,共计31个实验项目,反映了实验教学改革的成果;写作风格有明显创新,在简要介绍实验原理、材料的基础上,以新颖、独创的表格流程格式,清晰地描述了每个操作步骤的内容、要点(含注意事项、技巧分析),在结果部分分析了可能出现的常见问题及处理方法,以及每个章节和实验后都附有一定的思考题。教材在编写过程中,参照了国家级和省级实验教学示范中心建设要求,第三篇共计四章专题介绍设计型实验的选题、设计和论文撰写等,并给予实施案例。同时,为立足双语教学,方便部分院校的全英文教学需要,我们编写了双语实验部分。主要是在基础实验操作部分,选择了经典的实验项目,编写中英文对照版本,方便双语教学和留学生教学。《生物化学与分子生物学实验指导(双语版)》既可作为高等学校本专科生以及研究生的生物化学与分子生物学实验指导教材,又可作为相关专业人员了解、掌握生物化学与分子生物学实验技术的重要参考书。
第一篇 实验技术与原理
第一章 生物大分子样品制备
第一节 材料的选择与处理
第二节 细胞破碎
第三节 抽提
第四节 浓缩与纯化
第五节 样品保存
第六节 制备方案设计与评价
第二章 离心技术
第一节 基本原理
第二节 离心机的主要构造和类型
第三节 差速离心法
第四节 密度梯度离心法
第五节 分析超离心
第三章 层析技术
第一节 基本原理
第二节 吸附层析
第三节 疏水层析
第四节 离子交换层析
第五节 凝胶过滤层析
第六节 亲和层析
第四章 电泳技术
第一节 基本原理
第二节 醋酸纤维素薄膜电泳
第三节 聚丙烯凝酰胺胶电泳
第四节 印迹法(转移电泳)
第五节 毛细管电泳
第六节 琼脂糖凝胶电泳
第五章 分光光度法
第一节 基本原理
第二节 紫外一可见光光度法
第三节 荧光光谱分析法
第六章 分子克隆技术
第一节 基本原理
第二节 基因片段制备
第三节 质粒DNA制备
第四节 DNA重组
第七章 克隆化基因的表达与检测技术
第一节 基本原理
第二节 外源基因在原核系统中的表达
第三节 外源基因在真核系统中的表达
第四节 蛋白质western blot检测
第八章 核酸分子杂交
第一节 基本原理
第二节 核酸探针的制备和标记
第三节 Solnhern印记
第四节 Northern印记
第九章 聚合酶链反应(PCR)技术
第一节 基本原理
第二节 原位PCR
第三节 逆转录PCR
第四节 实时定量PCR
第五节 甲基化PCR
第二篇 基础实验操作
第十章 蛋白质
实验一 从牛奶中分离酪蛋白
实验二 蛋白质的定量测定
实验三 血清蛋白质的电泳分离
实验四 SDS—PAGE测定蛋白质相对分子量
实验五 离子交换层析分离混合氨基酸
第十一章 核 酸
实验六 人外周血基因组DNA提取
实验七 肝脏RNA提取(苯酚法)
实验八 核酸的定量测定(定磷法、紫外吸收法)
实验九 琼脂糖凝胶电泳分离DNA
实验十 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离RNA
实验十一 人基因组DNA多态性分析
第十二章 酶
实验十二 胰蛋白酶的分离纯化
实验十三 酸性磷酸酶Km和Vmax值测定
实验十四 唾液淀粉酶的最适pH测定
实验十五 乳酸脱氢酶同工酶分析
第十三章 物质代谢
实验十六 激素对血糖的调节作用
实验十七 转氨基作用(纸层析法)
实验十八 肌糖原酵解作用
实验十九 血清谷丙转氨酶(SGPT)活性测定(King氏法)
实验二十 脂肪酸的β-氧化作用
第十四章 分子生物学实验
实验二十一 质粒DNA的提取
实验二十二 DNA酶切及片段回收
实验二十三 PCR体外扩增目的基因
实验二十四 反转录PCR(RT—PCR)
实验二十五 大肠杆菌感受态细胞制备
实验二十六 重组质粒连接、转化与筛选
实验二十七 Southern杂交
实验二十八 Northern杂交
实验二十九 外源基因的诱导表达
实验三十 蛋白质印迹法检测蛋白
实验三十一 乙型肝炎的PCR诊断
第三篇 设计性实验
第十五章 设计性实验概述
第一节 背景介绍
第二节 基本类型和要素
第三节 组织实施
第十六章 实验选题和设计
第一节 实验选题
第二节 实验设计
第十七章 数据处理与论文撰写
第一节 结果观察与记录
第二节 数据处理与分析
第三节 实验报告的撰写
第四节 科研论文的撰写
第十八章 实施案例
第一节 设计性实验技术模块
第二节 设计性实验案例
附 录
参考文献